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反相色譜的影響因素：(1)柱長(zhǎng)有機(jī)小分子和肽類的分辨率隨柱長(zhǎng)的增加而增加.但是柱長(zhǎng)增加并不能使蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的分辨率顯著增加.它們?cè)谳^短的柱子上往往也有很好的分離效果。(2)流動(dòng)相的流速。有機(jī)小分子和肽類的分辨率對(duì)流動(dòng)相流速非常敏感。而蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的分辨率則不然。流速越小，柱子越長(zhǎng)，色譜峰的寬度就越大，分辨率就越小。制備色譜上樣過(guò)程中的流速對(duì)動(dòng)態(tài)吸附容量影響很大。(3)溫度。溫度上升，流動(dòng)相黏度下降，流動(dòng)速度加快，且流動(dòng)相與固定相之間的傳質(zhì)速度加快，使分...

C4色譜柱是一款適合于蛋白質(zhì)分離分析用的產(chǎn)品。它使用3微米粒徑的硅膠填料，優(yōu)化了孔徑，固定相配體的烷基鏈長(zhǎng)及表面鍵合密度，可實(shí)現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析。使用短柱可以在高流速下實(shí)現(xiàn)快速分析。C4色譜柱在使用前，先進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來(lái)，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照C4色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行，只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。1、樣品的前處理：①先使用流動(dòng)相溶解樣品；②...

HALO聚糖色譜柱是一種基于Fused-Core®技術(shù)的快速、高效型液相色譜柱。HALOGlycan是一種高極性固定相，通過(guò)創(chuàng)新的專有化學(xué)鍵合技術(shù)，將五羥基配體鍵合到硅膠的多孔殼層。這種高性能材料的色譜柱可用于親水作用色譜(HILIC)，以常規(guī)反相溶劑為流動(dòng)相，分離低聚糖，尤其是蛋白質(zhì)連接的聚糖。鍵合相：專有的親水配體，HALOGlycan色譜柱USP分類：L95粒徑大小：2.7μm孔徑大?。?0A聚糖色譜柱優(yōu)勢(shì)及最佳應(yīng)用：①提高酸性和兩性離子的保留；②對(duì)鹽濃度不敏感...

反相色譜柱是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，因此有較高的碳含量和更好的疏水性，對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力，適用范圍較廣，是高效液相色譜儀分析中首要選擇的色譜柱類型。目前，反相色譜柱適用范圍廣，從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離，在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學(xué)，生藥學(xué)和天然產(chǎn)物化學(xué)，生物物質(zhì)如多肽、蛋白、核酸等多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。反相色譜柱的結(jié)構(gòu)及主要功能：本產(chǎn)品是由柱管、接頭、封頭、密封環(huán)、壓帽、篩板、柱填料等組成。1、柱管：多用不銹鋼制成，壓力不高于...

色譜柱由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70kg/cm2時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20μm（5~10&μm），取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。色譜柱的作用機(jī)理：可以被認(rèn)為是反相液相色譜...

Dewetting孔去濕現(xiàn)象在方法開(kāi)發(fā)時(shí)需要考慮的一個(gè)重要因素就是固定相的“孔去濕”。當(dāng)固定相為高疏水（如C18），且流動(dòng)相從一個(gè)高有機(jī)相組分（40%乙腈或甲醇）變到另一個(gè)純水相或高水相組分的時(shí)候，就容易發(fā)生。這也是早期反相色譜柱常常遇到的問(wèn)題。色譜柱在高壓條件下，流動(dòng)相中的水會(huì)被“壓入”起保留作用的固定相孔結(jié)構(gòu)里；當(dāng)泵停止后，水則不會(huì)再進(jìn)入固定相孔內(nèi)。同時(shí)，由于固定相是疏水的，滯留于色譜柱中的水被從固定相孔結(jié)構(gòu)中排出。在重啟色譜泵后，即使是高壓也無(wú)法使流動(dòng)相中的水重新回到固...

C18色譜柱根據(jù)極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN、-NH3等官能團(tuán)的鍵合相硅膠柱；反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(tuán)（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還C8、C4、C2和苯基柱等。C18色譜柱的構(gòu)造：由柱管、壓帽、卡套、篩板、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的...

為了最大限度地延長(zhǎng)高效液相色譜柱的使用壽命并確保其最佳性能，有必要對(duì)色譜柱進(jìn)行適當(dāng)?shù)木S護(hù)。許多不同因素可能導(dǎo)致色譜柱分離度和靈敏度降低，但通常情況下，下列因素會(huì)導(dǎo)致絕大多數(shù)色譜柱出現(xiàn)性能問(wèn)題。1、污染物通常，樣品中含有來(lái)源于樣品基質(zhì)的成分，這些成分可能會(huì)吸附于色譜柱之上。鹽、脂類、增塑劑和聚合物是在分析過(guò)程中可能與固定相接觸的成分。這些成分會(huì)損壞色譜柱和檢測(cè)器，并在分析過(guò)程中出現(xiàn)雜質(zhì)峰。如果這些雜質(zhì)成分不能被流動(dòng)相洗脫，它們就會(huì)吸附在色譜柱上。隨著時(shí)間的推移，分析物會(huì)與這些雜...

HALO色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對(duì)混合物進(jìn)行先分離，而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC）及液-固色譜(LSC）?，F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。HALO色譜柱對(duì)高沸點(diǎn)、難氣化合物的混合物通過(guò)色譜柱核淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。在選擇HALO色譜柱...

AMT公司為您富有挑戰(zhàn)的分離量身定做了多種孔徑，那么如何選擇正確的孔徑呢？?根據(jù)您的分子大小和樣品中分析物的分子量范圍（MWs）來(lái)匹配填料孔徑（表A）。?小分子（®90?分析。-較小孔徑的填料具有更大的比表面積，可提高小分子分析物的保留和載量。-當(dāng)分析物與柱填料孔徑的比例大于0.1時(shí)，其在填料上的擴(kuò)散就會(huì)嚴(yán)重受阻，從而導(dǎo)致峰展寬和保留變差。?對(duì)于大環(huán)抗生素和多肽蛋白生物分子，應(yīng)使用較大的孔徑，如HALO®160?Peptide和HALO®400?Pro...

在分離度方程式中有三個(gè)變量：柱效（N）、選擇性（α）及保留因子（K）。我們可以看出，選擇性（α）是調(diào)整和提高分離度有效的參數(shù)。同時(shí)，色譜柱固定相是調(diào)整HPLC選擇性（見(jiàn)表B）中四個(gè)有效的參數(shù)之一。當(dāng)然，對(duì)于離子化分析物，流動(dòng)相pH是有效的調(diào)節(jié)參數(shù)。此外，與色譜柱固定相同樣重要的還有流動(dòng)相中有機(jī)溶劑（乙腈vs甲醇）的選擇、及有機(jī)溶劑含量/梯度斜率等等。在開(kāi)發(fā)一個(gè)色譜分析方法時(shí)，可以有多種方式來(lái)實(shí)現(xiàn)特定的分離和保留需求。一種是采取系統(tǒng)篩選多個(gè)固定相的方式，針對(duì)不同的分析，HALO...

柱外體積（ECV）是指色譜系統(tǒng)從進(jìn)樣器到檢測(cè)器這段管路除去色譜柱的總體積。大部分新的高效液相色譜系統(tǒng)都經(jīng)過(guò)了優(yōu)化，因此，可以使用高效的核殼顆粒（SPP）色譜柱，例如HALO?，F(xiàn)在讓我們簡(jiǎn)單概述一下高效液相色譜系統(tǒng)。一個(gè)典型的HPLC系統(tǒng)由脫氣機(jī)、泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱和檢測(cè)器。我們可以仔細(xì)看一下里面。柱外體積通常來(lái)自進(jìn)樣器，包括進(jìn)樣器本身、連接進(jìn)樣器與色譜柱的管路以及連接色譜柱與檢測(cè)器的管路、檢測(cè)器流通池、熱交換器以及各個(gè)連接配件所產(chǎn)生的任何體積。但是有很多舊的色譜儀仍在使用...