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色譜柱內(nèi)徑對(duì)小分子藥物靈敏度的影響
色譜柱內(nèi)徑對(duì)小分子藥物靈敏度的影響
更新時(shí)間:2023-02-13 點(diǎn)擊次數(shù):945
在實(shí)際工作中,色譜工作者們通常需要更高的靈敏度。而這一要求可以通過(guò)簡(jiǎn)單的改變色譜柱內(nèi)徑來(lái)達(dá)到。當(dāng)樣品濃度以及進(jìn)樣體積相同時(shí),通過(guò)減小色譜柱內(nèi)徑,可以提高紫外檢測(cè)器的響應(yīng)。以下應(yīng)用顯示了色譜柱內(nèi)徑對(duì)靈敏度的影響,將色譜柱內(nèi)徑從4.6mm減小到1.5mm,顯著提高了靈敏度。
分別使用長(zhǎng)度相同而內(nèi)徑不同的4支HALO色譜柱及其流速:
①
HALO 90? C18, 2.7 µm,
1.5 x100 mm(流速:0.2 mL/min);
②HALO 90? C18, 2.7 µm, 2.1 x 100 mm
(流速:
0.4 mL/min
)
;
③HALO 90? C18, 2.7 µm, 3.0 x 100 mm
(流速:
0.8 mL/min
)
;
④HALO 90? C18, 2.7 µm, 4.6 x 100 mm
(流速:1.88
mL/min
)
。
色譜條件:流動(dòng)相A:0.1% DFA;流動(dòng)相B:0.1% DFA 乙腈,梯度洗脫。柱溫:35℃;檢測(cè)波長(zhǎng):254nm;進(jìn)樣體積:1
µ
L。
如下圖所示,出峰順序依次為:1.阿替洛爾;2.吲哚洛爾;3.普萘洛爾;4.吲哚洛酚;5.萘普生;6.華法林。靈敏度隨著色譜柱內(nèi)徑的減小而提高。
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